mtt法检测细胞毒性

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　　一些研究人员甚至将 MTT 检测与流式细胞术 (FACS)结合使用，以从非活细胞中分选活细胞。然而，这种情况并不常见，并且有更好的 FACS 染色剂，例如碘化丙啶 (PI)。

　　细胞效价蓝、台盼蓝和 ATP 检测

　　如上所述，MTT 测定实际上是一种代谢测定，因为 MTT 分子需要进入细胞并使用 NADPH 转化为甲臜。虽然 MTT 新陈代谢的确切机制尚不清楚，但这意味着线粒体需要完好无损并发挥作用。所以，如果你添加一种会降低线粒体效率的细胞毒性物质，你可能会得到奇怪的结果。在这种情况下，了解其他活/死检测也很有用。研究中使用的其他主要细胞活力测定包括：

　　细胞滴度蓝：与 MTT 测定类似，该测定涉及将细胞与刃天青（蓝色）一起孵育，并在细胞代谢后形成试卤灵（粉红色）。通常代谢需要 1-4 小时，但它比 MTT 检测灵敏得多，因为您可以通过荧光 (Ex/Em 560 nm/590 nm) 测量产物。这种检测的主要优点是您不需要在 DMF/SDS 中重新溶解产品，因此它更简单。这也是一个很好的高通量检测！

　　台盼蓝排除法：如果您没有分光光度计，那么将台盼蓝染色法与显微镜一起使用很简单。因为台盼蓝是一种带电染料，它不能透过活细胞。因此，只需用台盼蓝孵育细胞并在显微镜下观察，您就可以直观地确定活细胞的数量（未标记）、非活细胞的数量（蓝色）和受损细胞的数量（略带蓝色）。计算不同视野中的单元格数量，您就完成了！活力只是活细胞除以细胞总数的比率。这种方法的缺点是您只测试细胞的膜完整性。你不知道这些细胞是真的无法存活还是只是受到了一点点损坏。

　　ATP 测定：当细胞无法存活时，它们不能再制造 ATP，而有活力和快乐的细胞可以制造 ATP。此外，一旦细胞死亡，ATP酶就会迅速分解ATP。使用这些信息，很容易看出为什么基于 ATP 的分析会非常有效。理论很简单——裂解细胞，阻止 ATP 酶水解 ATP，加入萤光素酶和萤光素。您将获得数小时的出色发光信号！

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